Klinische Relevanz des Coomb-Tests (Antiglobulintest)

Der Coombs-Test ist eine einfache und geniale Technik. Der Coombs-Test wurde erstmals 1908 von Moreschi beschrieben und 1945 von RR Coombs und Mitarbeitern wiederentdeckt, um nicht-agglutinierende Antikörper gegen die Erythrozyten-Antigene nachzuweisen.

(Die Antikörper werden als "nicht agglutinierende" Antikörper bezeichnet, da die Antikörper trotz ihrer Bindung mit den Antigenen auf Erythrozyten keine Agglutination verursachen konnten. Die Antikörper werden manchmal auch als "unvollständige Antikörper" bezeichnet, da die Antikörper dies nicht verursachen Agglutination. Die Struktur des Antikörpermoleküls ist jedoch nicht unvollständig.)

Tatsächlich binden die nicht agglutinierenden Antikörper an die Antigene auf der Oberfläche von Erythrozyten. Die erwartete Agglutination von Erythrozyten tritt jedoch nicht auf. Wenn ein anderer Antikörper (als Anti-Antikörper oder Antiglobulin bezeichnet) gegen den RBC-gebundenen Antikörper hinzugefügt wird, tritt eine Agglutination auf. Die Anti-Antikörper binden an die Fc-Regionen von RBC-gebundenen Antikörpern und bilden ein Gitter, das zur Agglutination führt. Der Test wird als Antiglobulintest oder Coombs-Test bezeichnet.

Es gibt zwei Arten von Anti-Globulintests:

1. Direkter Anti-Globulintest (DAT)

2. Indirekter Anti-Globulintest (lAT)

1. Direkter Anti-Globulintest (DAT) wird zum Nachweis von Antikörpern verwendet, die in vivo an Erythrozyten gebunden sind.

Gewaschene Erythrozyten eines Patienten werden mit Anti-Globulin gemischt.

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Die Anti-Globuline binden an nicht agglutinierende Antikörper auf der Oberfläche von Erythrozyten und verursachen eine sichtbare Agglutination. Das Testergebnis ist DAT-positiv (Abb. 16.6).

Daher deutet ein positiver DAT darauf hin, dass die roten Blutkörperchen des Patienten mit nicht agglutinierenden Antikörpern beschichtet sind und der Patient DAT-positiv ist.

ich. Positive DAT tritt bei Erythrozyten von Neugeborenen mit hämolytischer Erkrankung bei Neugeborenen auf (die Erythrozyten von HDN sind mit Anti-Rh-Antikörpern beschichtet).

ii. Derzeit wird DAT zum Nachweis von IgG-Antikörpern und C3b verwendet, die an der Oberfläche von Erythrozyten gebunden sind. Bei Patienten mit Hämolyse ist der DAT-Test nützlich, um zu bestimmen, ob die Hämolyse eine Immun-Ätiologie hat oder nicht.

Abb. 16.6: Direkter Agglutinationstest (DAT) von Coomb.

DAT wird verwendet, um die Anwesenheit von nicht agglutinierenden Antikörpern nachzuweisen, die an der Oberfläche von Erythrozyten gebunden sind. A. Die gewaschenen Erythrozyten des Individuums werden mit dem Anti-Globulin-Reagenz gemischt. Die Anti-Globuline binden an die Fc-Regionen der RBC-gebundenen Antikörper und verursachen sichtbare Agglutination, und das Individuum gilt als DAT-positiv. B. Wenn die Erythrozyten nicht mit Antikörpern beschichtet sind, kommt es nicht zu einer Agglutination, und es wird gesagt, dass das Individuum DAT-negativ ist. DAT wird auch verwendet, um das Vorhandensein von Anti-Rh-Antikörper-beschichteten Erythrozyten von Neugeborenen nachzuweisen, bei denen vermutet wird, dass sie an einer hämolytischen Erkrankung des Neugeborenen leiden

ich. Nicht-immune Ursachen der Hämolyse [wie disseminierte intravaskuläre Koagulation, Mangel an roten Blutkörperchen [wie Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase-Mangel (G6PD-Mangel), Membrandefekte der roten Blutkörperchen (wie erbliche Sphärozytose, PNH) und Hämoglobinopathien (wie z Sichelzellenanämie, Thalassämie)] sind DAT-negativ.

ii. Immune Ursachen der Hämolyse (wie autoimmune hämolytische Anämie, medikamenteninduzierte Hämolyse, hämolytische Transfusionsreaktionen) sind DAT-positiv.

iii. Eine positive DAT aufgrund von C3 allein wird bei Patienten mit kalten Autoantikörpern, paroxysmalem kaltem Hämoglobinurea und in einigen Fällen medikamenteninduzierter hämolytischer Anämien beobachtet.

2. Indirekter Agglutinationstest (IAT) dient zum Nachweis ungebundener Antikörper gegen Erythrozyten im Serum eines Patienten.

ich. IAT zum Nachweis von Anti-Rh-Antikörpern im Mutterserum:

Mutterserum wird mit Rh-positiven O-Blutgruppen-RBCs inkubiert. Wenn im Serum der Mutter Anti-Rh-Antikörper vorhanden sind, binden die Antikörper an die Erythrozyten. Die Erythrozyten werden dann gewaschen.

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Dann wird das Anti-Globulin-Reagenz hinzugefügt.

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Wenn Anti-Rh-Antikörper im Serum der Mutter vorhanden sind, werden die Erythrozyten agglutiniert und der Test ist für IAT positiv.

ii. IAT zum Nachweis von Antikörpern im Serum eines Empfängers gegen die Spender-RBCs während der Bluttransfusion:

Der IAT-Test wird häufig (vor der Bluttransfusion) bei der Kreuzabgleichung der roten Blutkörperchen des Spenders mit dem Serum des Empfängers eingesetzt, um das Vorhandensein von Antikörpern im Empfänger nachzuweisen, die mit den roten Blutkörperchen des Spenders reagieren können.

Waschen Sie die Erythrozyten des Spenders.

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Füge das Serum des Empfängers zu den Erythrozyten hinzu und inkubiere 30 Minuten bei 37 ° C.

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Waschen Sie die Erythrozyten.

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Fügen Sie das Anti-Globulin-Reagenz hinzu.

Die Entwicklung einer Agglutination zeigt an, dass das Serum des Empfängers Antikörper gegen die Spender-RBCs aufweist und der Test als positiv für Antikörper gemeldet wird. Ein positives IAT-Ergebnis zeigt an, dass das vorgeschlagene Spenderblut nicht an den betreffenden Empfänger übertragen werden sollte.

Gegenwärtige Präparate des Anti-Globulintestreagens (auch als Coombs-Reagens bezeichnet) enthalten einen "Cocktail" aus monoklonalen Antikörpern, die gegen humanes IgG und C3b gerichtet sind (die Bindung von nicht agglutinierenden Antikörpern an Erythrozyten aktiviert das Komplementsystem, das zur Ablagerung von C3b-Fragmenten führt Erythrozyten; daher sind die Erythrozyten neben Antikörpern auch mit C3b-Fragmenten beschichtet.