Katalasetest an Bakterien, um ihre Fähigkeit herauszufinden, Wasserstoffperoxid abzubauen (mit Abbildung)

Katalasetest an Bakterien, um herauszufinden, wie sie Wasserstoffperoxid abbauen kann (mit Abbildung)!

Prinzip:

Einige Bakterien haben die Fähigkeit, Wasserstoffperoxid (H 2 0 2 ) zu Wasser (H 2 O) und Sauerstoff (0, ↑) abzubauen, da sie das Enzym Katalase produzieren können.

Der Abbau von Wasserstoffperoxid durch Katalase wird durch Blasen von freiem Sauerstoffgas (0, ↑) angezeigt.

Beim Katalasetest wird eine Schleife der Testbakterien in einen auf einem Objektträger aufgenommenen Tropfen Wasserstoffperoxid gegeben. Wenn das Bakterium Katalase produzieren kann, bricht es Wasserstoffperoxid (H 2 O 2 ) in Wasser und Sauerstoff. Die Produktion von Sauerstoff führt zu Blasenbildung oder Schaumbildung, die sich im Tropfen bemerkbar machen.

Erforderliche Materialien:

Folien, saugfähiges Papier, Impföse, Bunsenbrenner, Laminar-Flow-Kammer, Wasserstoffperoxid (3%), isolierte Kolonien oder Reinkulturen von Bakterien.

Verfahren:

1. Ein Objektträger wird unter Leitungswasser gereinigt (Abbildung 7.18).

2. Die Folie wird mit Lappenpapier abgewischt und luftgetrocknet.

3. In der Mitte des Objektträgers wird ein Tropfen Wasserstoffperoxid (3%) entnommen.

4. Eine Schleife der Testbakterien wird aseptisch, vorzugsweise in einer Laminar-Flow-Kammer, mit Hilfe einer flammensterilisierten Schleife genommen und in den Tropfen Wasserstoffperoxid auf dem Objektträger gegeben. Die Schlaufe wird nach jeder Impfung sterilisiert.

Beobachtungen:

1. Sprudeln oder Schäumen tritt im Tropfen auf: Catalase-positiv.

2. Im Tropfen tritt kein Blasen oder Schäumen auf: Catalase negativ.

Vorsichtsmaßnahmen:

Bakterienkulturen aus Blutagarmedium können nicht für den Katalasetest verwendet werden, da Blut Katalase enthält und immer ein positives Ergebnis liefert. Katalase-negative Bakterien neigen dazu, in zuckerfreien Medien zu sterben, entweder weil sie H 2 0 2 produzieren oder weil sich H 2 0 2 in den Medien ansammelt, wenn sie Luft und Licht ausgesetzt werden.

Daher sollten Stammkulturen solcher Bakterien im Dunkeln gelagert werden und dort, wo der Zugang zu Luft eingeschränkt ist. Katalase kommt in fast allen Bakterien vor, die aerob wachsen können. Da das Enzym nur von lebenden Bakterien produziert wird, können Kulturen, die älter als 24 Stunden sind, nicht für den Katalasetest verwendet werden.